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发表于 2011-4-14 08:17:19
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实验室生物安全管理SOP
为了提高实验室的生物安全管理，采用适当的生物安全防护，降至感染的危险性。特制订以下标准操作规程。
一．实验室生物安全规程
1.进入规定
（1）在实验室入口处贴生物危害警告标志。未经许可，非工作人员不得进入实验室。外来人员不得进入、实习进修人员经过岗前培训后方可入室。
（2）实验室门应保持关闭状态；
（3）与实验室工作无关的物品不得带入实验室。
2.个人防护
（1）工作服：在实验室工作时，必须穿着工作服；
（2）手套：进行可能直接或间接接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料的操作时，应戴上合适的手套。脱手套后必须洗手。用过手套按感染性废物处置。
（3）洗手：处理完感染性材料，离开实验室前，必须洗手，必要时手消毒。
（4）其他防护：有可能受到喷溅物污染、碰撞或紫外线辐射的伤害时，必须戴合适的防护眼镜；
（5）不得穿着实验室工作服离开实验室；不得在实验室内穿露脚趾的鞋子；
（6）禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜；禁止在实验室工作区域内储存食品和饮料；
（7）在实验室内用过的工作服不得和日常服装放在同一柜子内。
3.实验室工作区
（1）实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品；
（2）每天工作结束之后，必须用500mg/L有效氯消毒液擦拭工作台面。用75%酒精消毒生物安全柜台面。活性物质溅出后要立即用500mg/L有效氯消毒剂消毒，严重污染时用1000mg/L有效氯消毒剂作用30分钟消毒；
（3）污染的材料、标本、培养物及菌种应先在产生地经高压灭菌处理或2000mg/L有效氯消毒液浸泡30分钟后，按感染性废物处置。
（4）可疑有污染的报告单、文件经消毒处理后方可带出。
二．实验室操作技术
1.标本的安全操作
（1）标本容器：标本用防渗漏有盖容器盛装，容器上贴标签。化验单要与标本容器分开放置；
（2）标本接收：在实验室专用的接收窗口或工作台接收标本；
（3）打开包装：容器要在生物安全柜内打开，容器有破碎或标本泄漏时，按规定拒收。
2.实验室的基本安全操作
所有标本在生物安全柜内操作，尽量减少气溶胶形成，工作台面随时消毒。
3.实验室的其他安全操作
（1）血清分离
①操作时应戴手套及防护眼镜；
②血液和血清应当小心吸取，不能倾倒。严禁用口吸移液管；
③移液管使用后含氯消毒液中浸泡30min，清洗后高压灭菌备用。
④带有血液的废弃标本管，放入感染性废物袋内，双袋包装，有效封口，密闭运送。
（2）装有冻干感染性物质安瓿的开启
①在生物安全柜内操作；
②首先用75％酒精消毒安瓿外表面，用砂轮在安瓿中部锉一痕迹；
③用酒精纱布将安瓿包住掰开；
④缓慢向安瓿中加入营养肉汤，避免出现泡沫。
三.实验室设备和仪器
1.生物安全柜
（1）操作步骤
①开启电源和内外风扇；
②在机器预热时将所需的物品置于安全柜内；
③准备一块浸有75%酒精的纱布；
④开始工作前及完成工作后，安全柜工作5min 来完成“净化”过程；
⑤手和双臂伸入到生物安全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕开始对物品进行处理；
⑥接种环灭菌时使用电子加热器，不得使用明火；
⑦实验结束时，生物安全柜里的所有物品都应清除表面污染，标本和培养基移出安全柜；用75%酒精擦拭工作台面、四壁及玻璃的内外侧等；
⑧有标本溢出污染时，用含氯消毒液消毒。
（2）注意事项
①实验之前将所需物品置于安全柜内，尽可能减少双臂进出次数；
②尽量减少操作者身后的人员活动；
③生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板；
④在生物安全柜内操作时，不能进行文字工作；
⑤Ⅱ级生物安全柜前面的进气格栅不能被遮挡；
⑥物品应放在靠近工作台后缘的位置，不阻挡后部格栅；
⑦可产生气溶胶的设备（如混匀器、离心机等）应靠近安全柜的后部放置；
⑧盛放生物危害性废弃物容器，放在柜内右侧，容器内放置含氯消毒液；
⑨安全柜运行时不能反复开关；当气流报警，立刻停止工作，并报告生物安全负责人。
2.低温超速离心机
（1）按照操作手册操作离心机；正确放置十字轴和离心桶；
（2）在使用前检查离心管和盛放离心标本的容器是否破损；
（3）用于离心的试管和标本容器应当牢固盖紧；
（4）离心桶的装载、平衡必须在生物安全柜内进行；离心桶和十字轴按重量配对，并在装载离心管后正确平衡；
（5）离心管不能装得过满，避免漏液；
（6）空离心管用蒸馏水平衡；
（7）每日使用后，用75％酒精清除离心桶、转子和离心机腔的污染，检查是否腐蚀或细微裂痕。
3.组织研磨器
（1）戴手套用75％酒精的纱布包住玻璃研磨器；
（2）在生物安全柜内进行组织研磨器的打开和操作。
4.冰箱与冰柜的维护和使用
（1）冰箱和低温冰箱通常每半年除霜和清洁，如有特殊情况应立即除霜和清理，清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护；
（2）储存在冰箱内的容器，应标明内装物品的名称、储存日期和储存者的姓名。未标明的或废弃物品应高压灭菌后丢弃；
（3）科室应有冻存物品的清单；
（4）冰箱内不能放置易燃溶液。
四.实验室意外事件或事故处理
工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内等视为安全事故。出现生物危害物的溢出、事故以及明显或可能暴露于高传染性物质时，必须向部门负责人报告。实验室必须保存事件或事故的书面报告。
1. 生物危害物的溢出处理
（1）潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）
①所有人员必须立即撤离相关区域；
②立即报告部门负责人；
③为了使气溶胶排出，在1 h 内严禁人员入内；
④门口张贴“禁止进入”的标志，过了相应时间后，在负责人的指导下来清除污染；
（2）生物危害物溢出清除程序：
①戴手套、口罩，穿防护服，必要时进行脸和眼睛防护；
②用浸有2000mg/L的含氯消毒剂的布覆盖并吸附溢出物；
③使用消毒剂时，从溢出区域的外围向中心进行处理；
④作用60min后，清理污物。如果含有碎玻璃或其他锐器，置于锐器盒中，处理过程防止损伤；
⑤必要时再次消毒处理；
⑥污染材料及用于清理的布和抹布放入感染性废物袋内；
⑦对污染的表册，应将这些信息复制后，置于感染性废物袋内。
（3）潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜内）
①在安全柜处于工作状态下立即进行清理；
②使用浓度为2000mg/L的含氯消毒剂，并在处理过程中尽可能减少气溶胶的生成，作用60min，用水擦拭干净；
③所有接触溢出物品的材料要用75%酒精消毒和／或高压灭菌。
（4）未装可封闭离心桶的离心机内盛有潜在感染性物质的离心管发生破裂
①关闭机器电源，让机器密闭30min使气溶胶沉积；
②通知生物安全负责人；
③戴厚橡胶手套操作；
④破碎的离心管、离心桶、十字轴和转子都放在75%酒精内消毒；
⑤未破损的带盖离心管应放在另一个有75%酒精的容器中，然后回收；
⑥离心机内腔用75%酒精擦拭；
⑦清理时所使用的全部材料都按感染性废弃物处理。
2.刺伤、切割伤或擦伤
（1）由近心端向离心端挤出伤口血液，在流动水冲洗受伤部位；
（2）用碘伏或其他皮肤消毒剂进行皮肤消毒，必要时做包扎处理；
（3）记录受伤原因和污染的微生物，及时上报相关部门，保留完整的医疗记录。
五.废弃物处理
废弃物处理的原则：感染性物品出实验室之前，必须进行无害化处理。
1.病原体的培养基、标本、菌种、毒种保存液等高危险废物的处理：
（1）置于感染性废物袋内收集、高压灭菌；无条件时用2000mg/L含氯消毒剂浸泡1h；
（2）无害化处理后再装入废物袋内，标识清楚，由专职人员负责清运；
（3）运送前必须检查医疗废物收集袋或容器封口是否严密，如有破损、泄漏应加套一层感染性废物袋，确保运送途中安全。
2.体液标本的处理：有污水处理的医疗机构，可直接将体液倒入污水池；无污水处理的，应先消毒后排放。
3.固体的感染性废物（废弃标本盒、塑料试管、手套等），置于感染性废物收集袋内，待转运。
4.锐器盒处理：锐器应使用利器盒收集，盛装废物至3/4满时即封口。
5.运送前必须检查医疗废物收集袋或容器封口是否严密，有无破损、泄漏等，如有破损、泄漏应加套一层包装袋，确保运送途中安全。
6.动物实验室应严格管理,防止逃逸或造成人与实验室动物的交叉感染;实验后的动物按病理性废物处理。
(下表：实验室的基本安全操作 )
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楼主: dearhang
