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发表于 2010-7-27 17:18:20
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涂片找真菌
1 检验目的：用革兰染色找酵母样菌，为临床感染的初步诊断和用药提供依据。
2 适用范围：各种涂片标本（主要如白带等）
3 检验原理
3.1 真菌的染色结构如革兰阳性菌细胞壁。
3.2 经过革兰染色后变成紫色，体形较细菌大容易辨认。
4 试剂：
4.1 试剂厂家：珠海贝索生物科技公司
4.2 包装规格：250ml×4
4.3 试剂盒组成
4.3.1 龙胆紫（龙胆紫、乙醇）
4.3.2 碘溶液（碘、碘化钾）
4.3.3 脱色液（丙酮、乙醇）
4.3.4 沙黄溶液（沙黄、乙醇）
5 仪器设备：奥林巴斯双目显微镜
6 操作程序
6.1 涂片：用无菌接种环取一环无菌生理盐水于玻片上，再用无菌接种环挑取所需菌落，在玻片的生理盐水上均匀涂抹，自然晾干。
6.2 固定：
6.3 将龙胆紫液（Crystal Violet）滴加在已固定的涂片上，染10秒钟后，水洗并甩干。
6.4 滴加碘溶液（Iodine Solution），10秒钟后水洗并甩干
6.5 再滴加脱色液（Decolorizer），脱色10－20秒（或摇动玻片至紫色不再脱落为止，根据涂片之厚薄之需要），水洗并甩干。
6.6 加沙黄溶液(Safranin Solution)复染10秒之后水洗。
6.7 以滤纸吸干或在空气中自然干后，油镜镜检。
7 结果观察
7.1 有真菌孢子及菌丝出现报告：找到真菌。
7.2 无真菌孢子及菌丝出现报告：未找到真菌。
8 质量控制：大肠埃希菌呈G－杆菌；金黄色葡萄球菌呈G＋球菌。
9 注意事项
9.1 涂片不能太厚，并且要均匀，否则菌体堆积或分散不匀，会影响染色结果。
9.2 脱色要至无蓝色脱落为止。
9.3 火焰固定时，应避免菌体过分受热而皱缩变形，影响结果的判断。
9.4 每次染色时应用大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌作阴阳性质控对照。
10 临床意义：辅助临床判断是否是药物引起的菌群失调或真菌感染。
11 支持文件：全国临床检验操作规程（第三版）东南大学出版社，2006
您医院临床医生经常开具这样的检测单吗？如大便、痰等找真菌，然后检验科所发的结果如：Tg（+），或者未找到真菌。各位大虾说说，我们该如何看待这样的检测以及如何判读检测结果？
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楼主: dearhang
